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新疆双峰驼乳对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肝脏的保护作用新疆双峰驼乳对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肝脏的保护作用 刘 宸1，冯鑫欢1，豆智华1，安淑静1，刘梦娇1，侯志梅2，杨 洁1,* （1.新疆大学生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐 830046;2.新疆医科大学第二附属医院老年病科，新疆 乌鲁木齐 830063） 摘要：本实验以链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱导的1型糖尿病小鼠为模型，探讨了全驼乳、驼脱脂乳、驼酪蛋白、驼乳清和驼乳清蛋白对糖尿病小鼠的影响，研究驼乳不同组分对1型糖尿病小鼠糖脂代谢、抗氧化能力、肝细胞形态以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPAR-γ）、固醇调节元件结合蛋白1c（sterol regulatory element binding protein 1c，SREBP1c）mRNA表达的影响。结果表明，除驼酪蛋白以外的其余组分均能增加糖尿病小鼠体质量、降低血糖浓度、升高血清胰岛素水平、恢复血脂水平、提高肝脏抗氧化能力，并减少肝组织的损伤。其中各项指标中，驼乳清组与模型组的变化最大，且差异极显著（P＜0.01）。经驼乳清组干预后的糖尿病小鼠肝PPAR-γ mRNA表达增加，SREBP1c mRNA表达下降。总地来说，驼乳清可有效改善STZ诱导的糖尿病小鼠糖脂代谢及肝组织损伤，其作用可能与上调PPAR-γ、下调SREBP1c mRNA表达有关。 关键词：驼乳;1型糖尿病;肝损伤;过氧化物酶体增殖物激活受体γ;固醇调节元件结合蛋白1c 新疆是双峰驼的主要分布地区之一，新疆双峰驼驼乳是新疆特色乳品资源[1]。驼乳中蛋白质含量高，具有较高的营养价值和较多的生物活性成分，被认为是最接近母乳的乳品[2]。驼乳常被用来治疗各种疾病，在抗癌、抗氧化等方面都有良好的效果[3]。研究表明，驼乳能够降低血糖和血脂水平、改善胰岛素抵抗，对糖尿病有良好的辅助治疗作用[4]。每天摄入一定量驼乳有助于控制1型糖尿病年轻患者的正常代谢[5]。并且研究发现，浓缩驼乳可以使链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱导的1型糖尿病大鼠模型的血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平以及体质量恢复至正常水平[6]。在经常饮用驼奶的地区，糖尿病的患病率极低[7]。有研究者经过3 个月的人群临床实验佐证了骆驼奶作为辅助治疗糖尿病药物的长期疗效和安全性[8]。但驼乳中所含物质众多，对糖尿病的辅助治疗机制尚不明确。 糖尿病是一种内科常见的慢性代谢性病症，目前没有完全治愈的方法，是一种慢性、非传染性和终身性的疾病[9]。糖尿病分为1型糖尿病和2型糖尿病，其中1型糖尿病是一种由胰岛β细胞选择性破坏引起的自身免疫疾病[10]，以胰岛素绝对缺乏为特征。肝病是1型糖尿病常见的一种慢性并发症。据报道，糖尿病人群中肝病发病率约50%[11]。由于肝脏代偿作用较强，早期糖尿病患者的肝损伤不明显，累积效应的作用会导致肝功能丧失而危及生命[12]。以往有研究表明糖尿病并发肝损伤的发病率逐年上升，其中主要包括脂肪肝、脂肪肝纤维化、脂肪肝硬化、非酒精性脂肪肝炎和晚期肝癌等[13-14]。肝脏是胰岛素抵抗发生的主要部位，而胰岛素抵抗又是糖尿病患者的典型症状，因此改善肝损伤对改善糖尿病具有重要意义[15]。驼乳能够改善糖尿病大鼠的体质量，降低血糖和血脂水平，使胰岛素水平正常化，调节血脂指标，增强抗氧化能力[16]。同时亦有研究证明驼乳对肝脏具有保护作用，能够改善肝损伤。但是具体是驼乳的哪些组分在起作用尚不清楚[17]。另外，有研究显示过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferatoractivated receptors，PPARs）和胆固醇调节元件结合蛋白（sterol-regulatory element binding proteins，SREBP1c）两个基因的表达会影响肝脏健康情况和胰岛素抵抗[18]。目前，1型糖尿病的治疗主要是注射胰岛素和服用降糖药。但是胰岛素疗法会增加患者低血糖的风险[19]，而降糖药物对患者有着不同程度的毒副作用[20]。因此寻找驼乳的有效作用组分十分具有研究意义。 本实验以STZ诱导的糖尿病小鼠模型为研究对象，探索驼乳不同组分对糖尿病小鼠血脂代谢的作用，同时研究驼乳清对PPAR-γ、SREBP1c mRNA表达的影响，以探寻肝损伤的机制。 1 材料与方法1.1 动物、材料与试剂18～20 g雄性SPF级ICR小鼠120 只，使用许可证号：SYXK（新）2003-0001 新疆医科大学动物实验中心。 新鲜驼乳购自新疆红雁池;链脲佐菌素 美国Sigma公司;血糖试纸 瑞士罗氏公司;盐酸二甲酸胍 中美上海施贵宝制药有限公司、小鼠胰岛素酶联免疫吸附检测试剂盒 上海心语生物科技有限公司;BCA蛋白定量、甘油三酯（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）等检测试剂盒南京建成生物工程研究所;TRIzol试剂、FastQuant RT Kit（含gDNase）、SYBR Green PreMix Plus 天根生化科技有限公司。所有分离用有机溶剂均为国产分析纯。 1.2 仪器与设备酶标仪 上海新振仪器设备有限公司;精密pH计上海仪电科学仪器股份有限公司;离心机 美国赛默飞世尔科技公司;真空冷冻干燥机 德国Christ公司;Light cycler 480实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction，qPCR）仪 瑞士罗氏公司。 1.3 方法1.3.1 样品制备 将新鲜驼乳5 000 r/min离心20 min，去除上层脂肪后即得脱脂乳。用冰乙酸将脱脂乳pH值调至4.6，40 ℃水浴20 min，随后4 ℃放置过夜，5 000 r/min离心20 min，沉淀为酪蛋白，上清液为乳清，根据硫酸铵沉淀表，在驼乳清中加入适量硫酸铵，4 ℃放置过夜，次日8 000 r/min离心15 min，弃上清液并将沉淀收集到透析袋中，脱去硫酸铵后得到驼乳清蛋白，各组均经冷冻干燥后于-20 ℃保存备用。 应对全球气候变化是人类共同的责任，我们必须增强适应气候能力，从减灾走向低碳经济，增强区域间合作和政府政策的协调，加强关于气候变化有关问题更多的研究，把全球气候变化带来的经济方面的危机变成经济未来发展的机遇，努力缓解全球气候变暖问题，促进可持续发展。 1.3.2 糖尿病小鼠模型的建立和分组 将120 只ICR小鼠适应性喂养7 d，所有小鼠禁食12 h。在避光冰浴条件下用柠檬酸钠缓冲液制备STZ溶液。15 只小鼠为对照组小鼠，腹腔注射不含STZ的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，其余105 只小鼠腹腔注射200 mg/kg mb STZ。在注射后7 d，禁食过夜检测空腹血糖浓度，空腹血糖浓度大于11.1 mmol/dL的小鼠视为糖尿病小鼠，用于后续实验。 成功造模的小鼠为84 只，成功率为80%，将糖尿病小鼠按血糖水平及体质量随机分为：糖尿病模型组、阳性药物组、驼乳组、驼脱脂乳组、驼酪蛋白组、驼乳清组和驼乳清蛋白组。阳性药物组用二甲双胍200 mg/kg mb灌胃;驼乳组、驼脱脂乳组、驼酪蛋白组、驼乳清组和驼乳清蛋白组，每组12 只，分别用200 mg/kg mb进行灌胃，各种冻干粉均用生理盐水溶解。正常对照组和糖尿病模型组用生理盐水灌胃，各组均连续灌胃28 d，每日一次。 1.3.3 体质量与血糖检测 各组小鼠每周均称量体质量并检测空腹血糖浓度（尾部采血法）。按式（1）和式（2）分别计算体质量增加率和降糖效率。 
式中：m1为第0周体质量/g;m2为第4周体质量/g。 化学作为一门传统的理工类学科，其实验复杂繁多，在进行实验教学中也很容易产生许多问题，导致教学效率缓慢.但是在高中化学实验教学中应用信息化技术可以极大地避免一些问题的发生，从而提高课堂的教学效率.在高中化学实验教学课堂中引入信息化技术的必要性具体表现在以下几个方面. 
式中：c1为第0周血糖浓度/（mmol/L）;c2为第4周血糖浓度/（mmol/L）。 1.3.4 血清胰岛素及血脂指标水平的测定 小鼠灌胃28 d后取血，将血静置待有上清液析出，3 000 r/min离心15 min后将上清液吸出并分装至新的无酶冻存管中，于-80 ℃保存，之后使用相关试剂盒进行检测。 1.3.5 小鼠肝脏的处理与观察 留守儿童是一个群体，是一个集合名词。在这个群体之中有明显的两类人，第一类孩子与大多数孩子无异，甚至在思想上要高于一般孩子，乐观坚强，关爱他人，常常苦中作乐，很容易被忽视；第二类孩子是心理自我疏导不够的孩子，性格内向，不善言谈，实际上他们也是向往童年肆意，天真烂漫的。基于这一了解，我就结合实际展开问题分析，尝试着探究原因，并提出策略。 小鼠给药28 d后，断颈处死并立即解剖，原位观察各脏器;肝脏称质量，剪取合适大小置于含有质量分数4%多聚甲醛的冷存管中，其余肝脏组织收集到免酶的冻存管中，做好标记，置于液氮罐中。 将质量分数4%多聚甲醛中固定的组织取出，不同体积分数乙醇梯度脱水，透明，包埋，切片，苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色，中性树脂封片，制成HE染色切片，光学显微镜下观察并拍照。 1.3.6 小鼠肝脏抗氧化指标水平的测定 另外，阳泉市大部分地表水污染相当严重，如桃河、温河水，水质类别为Ⅴ类，乃至劣Ⅴ类水，加之河流底泥污染严重，污染的河水通过以上废弃污染井的入渗污染下部地下水。 取出-80 ℃冻存的小鼠肝脏组织，利用小鼠检测试剂盒对GSH-Px、MDA、SOD水平进行检测。 小红美女，八艳们最喜欢的男人是不是那个开着宝马一来就撒钱的张大同。切，小红露出鄙夷的神情，他家就是开米铺了，虽说是江南最大的米铺，但还是一身铜臭味，姐妹们最不喜欢他。什么，铜臭味，那不是人民币的味道吗？！姐姐我最喜欢的就是人民币、美元、欧元……压抑住教训她的冲动，我继续做潜伏工作。 1.3.7 逆转录qPCR检测PPAR-γ和SREBP1c基因相对表达量 实验结束后，根据TRIzol提取RNA的方法依次加入氯仿、异丙醇、体积分数75%乙醇溶液提取RNA，然后根据FastQuant RT Kit（含gDNase）说明书要求，以总RNA为模板去除基因组DNA，逆转录为cDNA片段。最后以cDNA为模板，分别加入PPAR-γ、SREBP1c和GAPDH的特异性引物（序列见表1），按照SYBR Green qPCR PreMix试剂盒说明书操作方法进行扩增。用2-ΔΔCt法计算相对表达量。所有实验重复3 次。 2、提高林业企业资源支配的科学合理化。地方政府部门应提高国家林业资源开发相关政策的贯彻执行力，扩大当地林业资源的优势，实现当地林业资源价值的最大化。相关政府部门应严格按照招标工作流程和标准来筛选出符合条件的企业，并根据项目的实际情况来制定针对性强的考核目标。与此同时，还应加强对林业企业资源开发工作的监督管理力度，提高企业运营目标的阶段性和发展性，此外，林业企业还应根据不同的季节变化来开展相应的工作，最大程度的提高林业资源的有效利用率，避免林业资源被大规模损坏等情况的发生。 表 1 qPCR引物序列T
able 1 Primer sequences used for real-time polymerase chain reaction  目的基因 引物序列SREBP1c F：5’-CTCCGGCCACAAGGTACACA-3’R：5’-GAGGCCCTAAGGGTTGACACAG-3’PPAR-γ F：5’-TCCTGAGCCATGCAGAATTTAC-3’R：5’-AGTCTAAGGCCTCGCTGGTG-3’GAPDH F：5’-CCACCCATGGCAAATTCCATGGCA-3’R：5’-TCTAGACGGCAGGTCAGGTCCAC-3’
1.4 数据统计学分析实验数据使用Prism 5软件进行处理，各检测指标均以  ±s表示，采用单因素方差分析，P＜0.05表示差异显著。 与正常对照组小鼠相比，糖尿病小鼠摄食量、饮水量、排尿量明显增加，体质量下降，毛色暗淡，活动量减少，符合糖尿病“三多一少”症状，同时血糖浓度始终大于11.1 mmol/L，说明糖尿病模型稳定。 2.2 驼乳组分对糖尿病小鼠体质量的影响表 2 灌胃前后糖尿病小鼠体质量变化（n＝ 12）
Table 2 Changes in body mass of diabetic mice before and after intragastric administration (n= 12)  注：**.灌胃前（第0周）与正常对照组相比差异极显著（P＜0.01）;##.灌胃后（第4周）与糖尿病模型组相比差异极显著（P＜0.01）。 组别 体质量/g 体质量增加率/%第0周 第4周正常对照组 29.57±1.24 34.99±2.88## 18.33糖尿病模型组 24.13±2.46** 23.17±2.43 -3.82阳性药物组 24.11±2.64** 28.19±3.29## 16.92驼乳组 23.91±2.73** 27.88±2.25## 16.60驼脱脂乳组 24.39±3.27** 28.46±2.43## 16.69驼酪蛋白组 24.00±2.37** 26.40±2.77 10.00驼乳清组 23.73±2.44** 28.08±1.49## 18.33驼乳清蛋白组 24.68±2.09** 28.63±2.12## 16.00
由表2可知，给药4 周后，驼乳各组分均有增加糖尿病小鼠体质量的作用，虽然驼酪蛋白组体质量有所上升，但与糖尿病模型组无显著差异，其余组分均与糖尿病模型组有极显著差异（P＜0.01），而与正常对照组无显著差异。各组体质量增加率由大到小依次为：正常对照组（18.33%）=驼乳清组（18.33%）＞阳性药物组（16.92%）＞驼脱脂乳组（16.69%）＞驼乳组（16.60%）＞驼乳清蛋白组（16.00%）＞驼酪蛋白组（10.00%）＞糖尿病模型组（-3.82%）。驼乳清增加体质量效果更为明显，其体质量增加率与正常对照组无差异，优于阳性药物组，这可能是因为驼乳为高蛋白物质，有助于体质量的增加。 2.3 驼乳组分对糖尿病小鼠空腹血糖及胰岛素水平的影响表 3 糖尿病小鼠空腹血糖和胰岛素水平（n＝ 6）
Table 3 Fasting blood glucose and insulin contents of diabetic mice (n= 6)  注：**.与正常对照组相比差异极显著（P＜0.01）;与糖尿病模型组相比，#.差异显著（P＜0.05），##.差异极显著（P＜0.01），###.差异高度显著（P＜0.001）。 组别 第0周血糖浓度/（mmol/L）第4周血糖浓度/（mmol/L）第4周胰岛素质量浓度/（mg/mL）正常对照组 5.20±0.53 5.25±0.43### 3.13±0.34糖尿病模型组 18.66±3.70** 19.34±4.22 2.44±0.45**阳性药物组 18.93±3.86** 6.77±1.28### 2.97±0.18##驼乳组 18.41±3.27** 11.32±2.97### 2.85±0.18驼脱脂乳组 18.64±4.11** 10.09±3.22### 2.93±0.31#驼酪蛋白组 18.98±4.66** 15.04±4.62 2.80±0.22驼乳清组 18.82±4.61** 8.06±2.89## 2.94±0.20##驼乳清蛋白组 18.74±3.63** 9.28±3.23### 2.87±0.20#
由表3可知，在灌胃前，各组血糖浓度都明显上升，且与正常对照组相比均有显著性差异。在灌胃4 周后，糖尿病模型组胰岛素质量浓度与正常对照组相比极显著下降，且各组均能起到降低血糖的作用，但驼酪蛋白组无显著差异。阳性药物和驼乳清组的胰岛素质量浓度与模型组差异极显著（P＜0.01），驼脱脂乳和驼乳清蛋白组与模型组具有显著性差异（P＜0.05），其中驼乳清组血糖浓度降低到8.06 mmol/L左右，且胰岛素质量浓度提高到2.94 mg/mL，其血糖浓度降低量和胰岛素质量浓度升高量均接近阳性药物组。 经过二甲双胍和驼乳组分处理后，小鼠的血糖浓度与模型组相比明显降低，除驼酪蛋白组外，其他组与模型组相比均有显著性差异（P＜0.01，P＜0.001）。在给药4 周后，除驼酪蛋白组外，其余组分均与正常对照组无显著差异（P＞0.05），而且与糖尿病模型组有高度显著差异（P＜0.001），说明驼乳中除驼酪蛋白外，其余组分均能够降低血糖浓度，降糖效率由高到低依次为：阳性药物组（64.24%）＞驼乳清组（57.17%）＞驼乳清蛋白组（50.48%）＞驼脱脂乳组（45.87%）＞驼乳组（38.51%）＞驼酪蛋白组的（20.76%）＞正常对照组（-1.00%）＞糖尿病模型组（-3.64%）。驼乳组分中驼酪蛋白的降糖效率只有20.76%，效果较差，而驼乳清的降糖效果达到57.17%，仅次于阳性药物组。 驼乳组分均可提高糖尿病小鼠血清胰岛素含量，其中除了驼乳组和驼酪蛋白组与糖尿病模型组血清胰岛素质量浓度无显著差异外，其余各组血清胰岛素质量浓度均与糖尿病模型组有显著差异（P＜0.05），其中，驼乳清组和阳性药物组与糖尿病模型组相比胰岛素质量浓度极显著增加（P＜0.01）。 2.4 驼乳组分对糖尿病小鼠血脂指标的影响 图 1 驼乳组分对糖尿病小鼠血脂指标的影响
Fig. 1 Effect of camel milk components on blood lipid indexes of diabetic mice
从图1A中可看出，TC浓度中，除驼酪蛋白组与正常对照组有高度显著差异（P＜0.001），与糖尿病模型组无差异外，其余各组与正常对照组相比均无差异，其中阳性药物组、驼脱脂乳组合驼乳清蛋白组与糖尿病模型组有显著差异（P＜0.05），驼乳组、驼乳清组与糖尿病模型组相比差异极显著（P＜0.01）。TG浓度中，除驼酪蛋白外，阳性药物组、驼乳组和驼乳清蛋白组均与糖尿病模型组有显著差异（P＜0.05），驼乳清组、驼脱脂乳组与糖尿病模型组差异极显著（P＜0.01）（图1B）。HDL-C浓度中，除驼酪蛋白组外，驼乳组与糖尿病模型组相具有极显著差异（P＜0.01），驼脱脂乳、驼乳清组和驼乳清蛋白组同糖尿病模型组差异高度显著（P＜0.001），而阳性药物组同糖尿病模型组差异显著（P＜0.05）（图1C）。LDL-C浓度中，除驼酪蛋白组外，驼乳组和驼脱脂乳组与糖尿病模型组有显著差异（P＜0.05），驼乳清组、驼乳清蛋白组同糖尿病模型组差异极显著（P＜0.01）;而阳性药物组与糖尿病模型组并无差异（图1D）。总而言之，驼乳各组分中，除驼酪蛋白外，其余组分均可使糖尿病小鼠的血脂指标趋于正常值，即降低TC、TG、LDL-C水平并提高HDL-C水平。 2.5 驼乳组分对糖尿病小鼠肝脏组织的影响 图 2 各组小鼠肝脏组织切片（400×）
Fig. 2 Liver sections of mice in each group (400 ×)
由图2可看出，正常对照组小鼠肝脏组织结构清楚，呈放射状，组织间无充血，肝窦清晰;糖尿病模型组小鼠肝脏组织结构破坏，无放射状，组织间充血，肝索结构消失，细胞水肿，组织间出现空泡化，肝窦结构不明显;阳性药物组小鼠肝脏组织结构与模型组相似，无放射状，组织间充血并出现空泡化。驼乳、驼脱脂乳、驼酪蛋白、驼乳清及驼乳清蛋白组小鼠肝脏组织结构形态与糖尿病模型组相比明显恢复，充血、水肿及空泡化均有改善，说明驼乳不同组分对糖尿病小鼠的肝脏具有保护作用，其中驼脱脂乳、驼乳清、驼乳清蛋白组的修复作用更好。 2.6 驼乳组分对糖尿病小鼠肝脏抗氧化能力的影响 图 3 糖尿病小鼠肝脏抗氧化指标的检测结果
Fig. 3 Serum antioxidant indices in diabetic mice
由图3可知，驼酪蛋白组中的SOD活力与正常对照组有显著差异（P＜0.05），与糖尿病模型组无显著差异，其余各组分中阳性药物组与糖尿病模型组有显著差异（P＜0.05），与正常对照组无差异。驼乳组和驼乳清蛋白组与糖尿病模型组差异极显著（P＜0.01），驼脱脂乳组合驼乳清组与糖尿病模型组差异高度显著（P＜0.001）。驼酪蛋白组中的GSH-Px活力和MDA含量与正常对照组有高度显著差异（P＜0.001），而与糖尿病模型组无显著差异，其余各组分均与糖尿病模型组有高度显著差异（P＜0.001）。除驼酪蛋白外，其余组分均可改善糖尿病小鼠肝脏抗氧化能力，即降低MDA水平并增加SOD、GSH水平。 （3）对于双重管桩，其浆液的压力与比重分别为20～40MPa、1.30～1.50，在喷浆时所用喷嘴的直径按2～3mm控制，每分钟浆液的流量控制在80～100L范围内，当采用压缩空气时，应将压力控制在0.7～0.8MPa范围内。 2.7 PPAR-γ和SREBP1c基因的表达由图4可见，糖尿病模型组的PPAR-γ mRNA的表达较正常对照组高度显著下调（P＜0.001），SREBP1c mRNA表达较正常对照组显著上调（P＜0.05）。驼乳清组PPAR-γ mRNA表达较糖尿病模型组高度显著上调（P＜0.001），SREBP1c mRNA表达较糖尿病模型组显著下调（P＜0.05），这说明驼乳清能够提升PPAR-γ的表达，抑制SREBP1c的表达。 在这拳重击下一威尔向旁边踉跄了几步，一只手捂着脸，另一只手抵挡艾尔的新一轮进攻。从他流露出的痛苦表情可以判断，挡住下一拳和已经挨的一拳都很痛。艾尔出手慢，但是有力道。  图 4 各组小鼠肝脏PPAR-γ（A）和SREBP1c（B）mRNA表达结果
Fig. 4 mRNA expression of PPAR-γ (A) and SREBP1c (B) in the liver of mice in each group
3 讨 论有研究者通过硫酸铵沉淀后离心得到驼乳清，冻干后制成驼乳清粉，发现能够有效促进糖尿病小鼠的伤口愈合，并起到降低血糖的作用，其蛋白活性并未丧失[21]。同样有研究证明冷冻干燥后的驼奶粉的营养特性基本不变[22]。所以本研究采用冻干后的驼乳组分进行灌胃研究。 吸收剂含量不仅对涂层的孔隙率、结合强度等具有重要的影响，而且对涂层的吸波效果具有显著的影响。不同的吸收剂具有不同的吸波性能，选择合适的吸收剂含量对制备吸波效果好的涂层而言至关重要。通常，最小反射损耗越小(由于是负值，因此实际上是其绝对值越大)，有效吸收带宽(文中如无特别说明，指反射损耗小于-10 dB的频率范围)越大，涂层的吸波性能就越好。目前已有大量研究关注了吸收剂含量对涂层吸波性能的影响。 驼乳中具有降糖活性的物质，一方面可能与驼乳中高浓度的胰岛素有关，有研究表明新疆双峰驼乳中胰岛素含量为（63.76±7.77）μU/mL[23]，更接近人乳中胰岛素含量。且驼乳中还含有胰岛素/胰岛素样蛋白，可起胰岛素样作用[24]。且有报道指出这种胰岛素样蛋白在酸性环境下不会形成凝固结构，在胃酸中可以保持原有的结构而不易被破坏，使得胰岛素样蛋白可以通过胃而进入肠道，从而起到降低血糖的作用[25]。另一方面可能与驼乳清蛋白中的活性物质有关，驼乳清蛋白被认为是一种强大的天然抗氧化剂，含有乳铁蛋白、乳蛋白、乳球蛋白、乳糖过氧化物酶、溶菌酶等多种成分，富含免疫球蛋白，它可减少氧化应激，增强免疫系统功能，增加谷胱甘肽水平[26]。而本研究中驼乳清的降糖降脂活性较驼乳清蛋白好，可能就是因为驼乳清中的营养物质在起作用[27]。从体质量、血脂指标水平、血糖水平、胰岛素水平以及抗氧化能力中可以看出，驼乳具有良好的改善作用，且脱脂驼乳的效果比驼乳更好，这说明脂肪在调节糖脂代谢和氧化应激方面作用不大，甚至还有抑制作用。将酪蛋白提取后发现其具有一定效果，但并不明显，而驼乳清组改善糖脂代谢和肝损伤方面都具有良好的效果，并且对体质量的增加效果十分明显。将驼乳清蛋白单独提取出后效果反而降低，这有可能是驼乳清中还有一些微量元素在起作用，也可能是蛋白提取过程中活性有一定损失，这些都需要后续进行研究。 肝损伤是糖尿病严重的并发症之一，糖尿病时由于胰岛素抵抗，肝脏对胰岛素作用的敏感性下降，导致肝脏对葡萄糖的摄取及利用减少，糖脂代谢进一步紊乱。由于糖尿病患者的糖脂代谢紊乱，导致肝细胞对甘油三酯的摄取增加，从而大量的脂肪在肝脏堆积，进而对肝脏产生损伤，同时这也是糖尿病患者产生脂肪肝的原因[28]。糖尿病患者肝脏受到损伤后，肝细胞的抗氧化酶活性降低，产生大量的氧自由基，进而导致氧化应激和脂质过氧化[29]。有研究证明当PPAR-γ上调且SREBP1c下调时能影响三酰甘油的表达水平，从而降低脂肪堆积和氧化应激，起到保护肝脏的作用[30]。PPARs属于核受体家族成员，其作用与糖脂代谢、脂肪形成、炎症及胰岛素敏感性等生物学功能紧密相关[31]。目前已知PPARs与胰岛素抵抗有着密切的关系，可以通过调控糖稳态和胰岛素敏感性以及抗炎症和抗增殖活性来发挥作用[32-33]。它还调控葡萄糖转运蛋白的表达，能够抑制脂肪细胞的活性[34]，参与调节肝细胞和肌肉组织内脂肪细胞分化[35]和脂肪生成[36]。SREBP1c通过调节脂肪酸合成酶和乙酰辅酶a羧化酶等脂肪生成基因的表达，控制甘油三酯和脂肪酸的合成，同时还调节葡萄糖磷酸激酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶等葡萄糖代谢基因的表达[37]。有研究表明SREBP1c过低会导致胰岛β细胞活性下降，而SREBP1c的过表达则会增加高糖刺激下的胰岛素分泌，且还能够调控胰高血糖素的表达[38]。SREBP1c上调会促进脂肪的生成以及有害脂类物质的生成，这些都会干扰胰岛信号的转导，从而间接促进了肝脏胰岛素抵抗的发生。PPAR-γ和SREBP1c mRNA表达量的比值也能对胰岛素抵抗产生影响，从而改变血糖的浓度[18]。经研究发现驼乳也具有保护糖尿病小鼠肝损伤的活性[39]。本研究结果中驼乳可增加SOD、GSH-Px活力，降低MDA水平，提高糖尿病小鼠的抗氧化能力。驼乳清能够上调PPAR-γ mRNA表达，抑制SREBP1c mRNA表达，保护糖尿病小鼠的糖脂代谢紊乱及肝组织损伤。 综上所述，经驼乳组分处理后，除驼酪蛋白外，其余组分均能降低TC、TG、LDL-C浓度，提高HDL-C浓度，降低血糖浓度、体质量，同时能够降低肝脏的MDA水平，增加SOD和GSH水平。从肝脏切片中可以看出，不同组分的驼乳对糖尿病小鼠的肝脏都具有保护作用，驼脱脂乳、驼乳清、驼乳清蛋白组的修复作用较好。在各组指标中，驼乳清效果相对更加明显，效果较好。同时驼乳清组能够通过上调PPAR-γ mRNA、下调SREBP1c mRNA来调节糖尿病小鼠的糖脂代谢和氧化应激，从而来保护糖尿病小鼠肝脏。但糖尿病发病机制复杂，影响因素众多，对于驼乳清辅助降糖、保护糖尿病肝损伤的相关机制还需进行深入研究。 尾矿的综合利用在我国起步较晚，虽然发展迅速，并已取得了较大的进展，但是仍然存在着不少的技术难题，全面提高矿山尾矿综合利用水平仍然是一项艰巨的任务。 参考文献： [1] 邓杰. 浅谈驼乳的研究现状及新疆骆驼乳开发前景[J]. 食品安全导刊, 2018(6): 123-125. 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Protective Effect of Xinjiang Bactrian Camel Milk on the Liver of Streptozotocin-Induced Diabetic Mice LIU Chen1, FENG Xinhuan1, DOU Zhihua1, AN Shujing1, LIU Mengjiao1, HOU Zhimei2, YANG Jie1,*
(1. College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Ürümqi 830046, China;2. Department of Geriatrics, The Second Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Ürümqi 830063, China) Abstract: In this research, the effect of whole milk, skim milk, milk casein, whey and whey proteins from bactrian camels in Xinjiang on glycolipid metabolism, antioxidant status, hepatocyte morphology, and the mRNA expression of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR-γ) and sterol regulatory element binding protein 1c (SREBP1c) in streptozotocin (STZ)-induced type 1 diabetic mice was investigated. The results showed that all samples except camel milk casein could increase the body mass of diabetic mice, reduce blood sugar, increase serum insulin level, restore blood lipid levels to normal, improve liver antioxidant capacity, and reduce liver tissue damage. In terms of these indicators, the whey treatment group differed more significantly from the model group than did other treatment groups (P ＜ 0.01). Camel whey could increase the expression of PPAR-γ and reduce the expression of SREBP1c in the liver of diabetic mice. In summary,camel whey could effectively improve glycolipid metabolism and relief liver tissue damage in STZ-induced diabetic mice and its effect might be related to the up-regulation of PPAR-γ and the down-regulation of SREBP1c. Keywords: camel milk; type 1 diabetic; liver injury; peroxisome proliferator-activated receptor γ; sterol regulatory element binding protein 1c
DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190322-293 中图分类号：Q519 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2020）09-0074-07 引文格式： 刘宸, 冯鑫欢, 豆智华, 等. 新疆双峰驼乳对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肝脏的保护作用[J]. 食品科学, 2020, 41(9):74-80. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190322-293. http://www.spkx.net.cnLIU Chen, FENG Xinhuan, DOU Zhihua, et al. Protective effect of Xinjiang bactrian camel milk on the liver of streptozotocin-induced diabetic mice[J]. Food Science, 2020, 41(9): 74-80. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190322-293. http://www.spkx.net.cn收稿日期：2019-03-22 基金项目：国家自然科学基金地区科学基金项目（8186080200） 第一作者简介：刘宸（1996—）（ORCID: 0000-0003-4905-6729），男，硕士研究生，研究方向为天然产物与功效性食品。E-mail: liuchenstc@163.com
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发表于 2021-2-4 16:12:06
